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第六节 血清铁蛋白测定
铁蛋白( ferritin,Ferr)为体内铁的存储形式,由24个亚基及2500个左右Fe 3 +构成,分子量因Fe 3 +含量不同而异,一般≥440kD。构成Ferr的亚基包括酸性的H型(重型)和弱碱性的L型(轻型)亚基。转铁蛋白( TRF)结合Fe 3 +后形成的TRFFe 3 +复合物,与多种细胞包括骨髓造血细胞表面的TRF受体结合后,被摄入细胞解离出Fe 3 +,除供合成血红蛋白、肌红蛋白、细胞色素外,还与Ferr的L型亚基结合,生成铁蛋白存储,在体内铁代谢上发挥调节作用。Ferr广泛分布于体内多种组织细胞及血浆中。血清Ferr可用各种定量免疫学方法测定,下面以应用较多的免疫比浊法为例介绍。
【原理】
将抗人Ferr多或单克隆抗体加入样本血清中,通过抗原-抗体反应与血清中Ferr特异性结合,形成免疫复合物微粒,导致浊度增加。在一定的条件下,如合适的抗原、抗体浓度、免疫复合物微粒径/入射光波长比值等,浊度的增加与免疫复合物微粒数即Ferr数相关,得以定量样本中Ferr浓度。浊度改变的检测包括散射浊度法和透射浊度法2类方法(参阅本章第二节血清白蛋白测定中的免疫比浊法)。因后一种方法在自动生化分析仪上即可完成,广泛使用。
【试剂】
选用有正式批文、量值可溯源至人铁蛋白WHO standard ( 1 st)参考物的质量可靠产品。
【操作】
不同实验室具体反应条件会因所用仪器和试剂而异,在保证方法可靠的前提下,应按仪器和试剂说明书设定测定条件,进行定标品、质控样品和样品分析。
【结果计算】
根据待测样本浊度,按系列浓度Ferr标准品绘制的曲线及拟合的方程式,自动计算出样本中Ferr浓度。
【参考区间】
成人血清Ferr浓度(透射浊度法) :男性及50岁以上女性30~400μg/L ( 67~899pmol/L) ; 50岁以下女性15~150μg/L ( 34~337pmol/L)。
儿童(透射浊度法) : 1个月内 150~450μg/L ( 337~1011pmol/L) ;第2~3个月 80~500μg/L ( 180~1123pmol/L) ; 3个月~16岁 20~200μg/L ( 45~449pmol/L)。
2种单位间换算公式为μg/L×2.25 = pmol/L。
以上参考区间引自试剂说明书。
【注意事项】 1.方法学特点
本法人血清Ferr最低检测限为10μg/L ( 22.5pmol/L),线性范围为15~800μg/L ( 34~1800pmol/L),批内CV<2.0%、批间CV<6.6%。黄疸、轻度溶血、类风湿因子<1200IU/ml及高甘油三酯(≤8.48mmol/L)标本对本法无显著干扰。
2.影响因素
有关透射浊度法的一些共同影响因素,参阅本章第二节血清白蛋白测定中免疫比浊法的注意事项。
3.参考区间应用
以其他定量免疫学方法,包括散射免疫浊度法及透射比浊法不同厂家试剂盒测定的结果均存在差异,应建立使用方法的本实验室参考区间。
【临床意义】
血清Ferr浓度为反映体内铁存储状况的可靠指标,与骨髓铁染色结果相关性好;也作为肿瘤标志物用于多种恶性肿瘤的辅助诊断。
1.降低
成人血清Ferr<14μg/L是诊断缺铁性贫血的敏感指标。成人血清Ferr降低也见于其他失血性贫血、慢性贫血。
2.升高
见于肝脏疾病、血色病、输血引起的铁负荷过度,急性感染,铁粒幼细胞贫血及甲状腺功能亢进患者。肝癌、乳腺癌、肺癌、胰腺癌、白血病及淋巴瘤等多种恶性肿瘤患者血清Ferr可明显增高,可能与肿瘤细胞中Ferr合成和释放增加有关。